液体活检领域,绝对是领先水平!」
说完,孙长明往椅背上一靠,端起桌上的水杯喝了一口,等待着惊叹声。
1.75的纯度,在08年,确实值得骄傲。
然而,实验室里众人的表情都怪怪的。
大家面面相觑,好像不知道该说什麽好。
孙长明皱了皱眉:「怎麽?没听懂?也是,这套酶解过柱的体系确实复杂了点,你们刚接触湿实验,慢慢来————」
「不是,孙教授。」陈浩默默地举起了手,「我有个问题。」
「你说。」孙长明点点头。
陈浩语气真诚地发问:「既然是要解决蛋白污染和降解的问题,为什麽一定要用蛋白酶K去水浴消化一个小时,还要花那麽高成本去买离心柱反覆洗脱呢?」
孙长明愣了一下:「不用这些,你怎麽去蛋白?怎麽提纯?」
陈浩理所当然地回答:「双重氯仿抽提,加糖原共沉淀啊,我们老大提出来的这个方法,牺牲点第一次的上清液体积,再加一次氯仿离心,蛋白就全沉下去了,然後补5微升糖原把RNA析出来,整个流程下来四十分钟就搞定了,效果很好呀,为什麽要搞得像你那麽复杂?」
孙长明:「?」
反应了半天後,孙长明抗拒道:「不对,氯仿确实能去蛋白,但你抽提两次,水相里的RNA早就流失得七七八八了,就算加了糖原,浓度也绝对达不到下游要求,纯度就更别提了,能过1.5都算你们运气好。」
「可是————」蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
「没什麽可是的,科研需要的是严谨,你们用这种糙办法,跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。」
就在这时,很巧嗷。
离心机跑的新一批内容出来了。
陈浩道:「孙教授,数据是不是真的,测一下就知道了。」
蔡卓群立刻上前,打开离心机盖,加入无酶水,溶解。
NanoDrop分光光度计前。
1微升的样本滴入基座。
测量!
屏幕刷新,一排数据跳了出来。
浓度:14.5ng/ul。
A260/280:1.95。
A260/230:2.03。
孙长明:「啊?」
1.8到2.0是RNA纯度的完美区间。
他引以为傲、耗时四小时、加
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